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生化檢測法快速檢測蔬菜農藥殘留
發布人:  發表日期:2022-02-23

目前,農藥殘留快速檢測方法很多,按分類可分為生化檢測法和色譜快速檢測法。生化檢測法中又以酶抑制法應用最為廣泛。該法由于操作簡單,成本較低,較短時間內能檢測大量樣本(每次檢測時間約20分鐘),特別適合在果蔬生產基地和蔬菜批發市場使用。我站新引進"NC一800"農藥殘留快速測定儀,就是利用生物體內提取液進行生化反應來判斷是否存在農藥殘留及污染的情況。此項工作開展1年來,檢測準確率高、效果好,群眾很受歡迎。

一、工作原理

        在一定條件下,有機磷和氨基甲酸脂類農藥能抑制乙酰膽堿酶的活性,其抑制率與農藥的濃度呈正相關,加入反應試劑——酶后,應用分光光度法測定吸光值隨時間的變化值計算出抑制率,來判斷農藥殘留是否超標。

二、操作步驟

        1.樣品提取取2克蔬菜樣品(葉菜類要剪成寬度1厘米左右的菜樣,塊根菜取1厘米左右的表皮樣品)放入三角瓶中,用專用移液器,加入10毫升緩沖液振蕩2分鐘后倒入放有過濾紙的三角瓶上,濾出的液體即為待測試報。

        2.樣品測試在1厘米的比色皿中,加入酶100微升,然后加入待測試液2.5毫升,搖勻,靜置10分鐘后,再加入顯色劑100微升,然后加底物20微升,搖勻后馬上放入測定儀,按“樣品測量”鍵,1分鐘后,數據結果馬上可打印出來(可貯存3000條數據)。由于測定儀有6個樣品通道,可同時測6個樣品。

        3.結果判斷樣品的抑制率在40%~50%之間,為懷疑農藥含量超標,為求數據準確性,最好重做1次;或用氣相色譜法進一步確認,若抑制率大于50%即為農藥超標。

三、注意事項

        1.磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水,否則影響準確性。

        2.酶試劑及底物要在0~5℃溫度條件下保存,以確保酶的活性,因此,應在冰箱中保存,但不能凍至結冰。

        3.微量移液器要專用,貼上標簽,避免交叉使用造成試劑污染;試劑從試劑瓶吸出后,不能再放回瓶中,堅持只吸不進的原則,防止試劑污染。

        4.樣品測試的最后一道程序,即加底物后,應馬上搖勻,放入測定儀,否則影響數據準確性。經實踐,在菠菜樣品的測試中,立刻放入的抑制率為21.4%,1分鐘后放入的51.7%,可見,加試劑后放入時間的長短可影響其準確性。

        5.韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質,容易產生假陽性。因此.,處理這類樣品時,可采取整株蔬菜浸出提取液的方法(不要搞爛樣品)。對葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取類似方法。

        6.該法只是定性檢測法,只能檢測有機磷和氨基甲酸酯類農藥,不適用于其它類型農藥的檢測。

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